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      畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量測定方法 GB/T 14931.1-94

      2008-12-19 [3094]

       中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

      畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量測定方法 GB/T 14931.1-94
      (
      液相色譜法)
      Method for determination of oxytetracyline tetracyline and
      chlortetracycline residues in meat (HPLC)
      ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
      1
       主題內(nèi)容與適用范圍
        本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量的檢測方法。
        本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種食用畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量的測定。zui低檢出濃
      度為:0.15,0.20, 0.65mg/kg
      2
       原理
        樣品經(jīng)提取,微孔濾膜過濾后直接進(jìn)樣,用反相色譜分離,紫外檢測器檢測,與標(biāo)準(zhǔn)
      比較定量,出峰順序?yàn)橥撩顾亍⑺沫h(huán)素、金霉素。標(biāo)準(zhǔn)加法定量。
      3
       試劑
      3.1
       乙腈(分析純)。
      3.2
       0.01 mol/L磷酸二氫鈉溶液:稱取1.56 g(±0.01g)磷酸二氫鈉(NaH2PH4.2H2O)溶于
      蒸餾水中,定容到100 mL,經(jīng)微孔濾膜(0.45 μm)過濾,備用。
      3.3
       土霉素(OTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取土霉素0.0100g(±0.0001g),用0.1mol/L鹽酸溶液每毫
      升含土霉素1mg
      3.4
       四環(huán)素(TC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取四環(huán)素0.0100g(±0.001g),用0.01 mol/L鹽酸溶液溶解
      并定容10.00 mL,此溶液每毫升含四環(huán)素1mg。
      3.5
       金霉素(CTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取金霉素0.0100g(±0.0001g),溶于蒸餾水并定容成10.00
      mL
      ,此溶液每毫升含金霉素1mg
        以上標(biāo)準(zhǔn)品均按1000單位/mg折算。3.33.5溶液應(yīng)于4以下保存,可使用1周。
      3.6
       混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:取3.3、3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.00 mL,取3.5標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00 mL,置于10mL
      容量瓶中,加蒸餾水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、四環(huán)素各0.1mg,金霉素0.2mg,臨
      時(shí)現(xiàn)配。
      3.7
       5%高氯酸溶液。
      4
       儀器
      4.1
       液相色譜儀(HPLC):具紫外檢測器。
      5
       色譜條件
      5.1
       柱:ODS-C18 (5 μm) 6.2mm×15 cm。
      5.2
       檢測波長:355 nm
      5.3
       靈敏度:0.002 AUFS
      5.4
       柱溫:室溫。
      5.5
       流速:1.0mL/min
      5.6
       進(jìn)樣量:10 μL。
      5.7
       流動(dòng)相:乙腈/0.01 mol/L磷酸二氫鈉溶液(30(V/V)硝酸溶液調(diào)節(jié)pH2.5),35:65
      (V/V)
      ,使用前用超聲波脫氣10 min
      6
       操作方法
      6.1
       樣品測定:稱取5.00 g(±0.01 g)切碎的肉樣(5 mm),置于50 mL錐形燒瓶中,加
      5%高氯酸25.0mL,于振蕩器上振蕩提取10 min,移入到離心管中,以2000 r/min離心
      3min,
      取上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾,取溶液10μL進(jìn)樣, 記錄峰高,從工作曲線上查得含量。
      6.2
       工作曲線,分別稱取7份切碎的肉樣,每份5.00 g(±0.01 g),分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)溶
      0、25、50、100150、200、250 μL(含土霉素、四環(huán)素各為0、2.5、5.010.0、15.0
      、20.025.0 μg, 含金霉素0、5.0、10.020.0、30.0、40.0、50.0 μg), 6.1方法操
      作、以峰高為縱坐標(biāo), 以抗生素含量為橫坐標(biāo), 繪制工作曲線。

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